WA 0813-8792-7402 | JUAL IL-10 (Interleukin 10) ELISA Kit
Interleukin 10 (IL-10) merupakan salah satu sitokin anti inflamasi, Protein Interleukin-10 berbentuk homodimer yang masing-masing sub unitnya memiliki 178 asam amino, Interleukin-10 diklasifikasikan sebagai sitokin kelas-2 yang termasuk juga IL-19, IL-20, IL-22, IL-24 (Mda-7), IL-26 dan IFN-alpha, -beta, -epsilon, -kappa, -omega, IFN gamma dan IFN lambda.Interleukin-10 berfungsi sebagai penjaga tubuh dari patogen sehingga mencegah kerusakan pada tubuh dan mempertahankan homeostasis jaringan normal juga Interleukin-10 dapat menghambat aktivitas NF-κB dan terlibat dalam regulasi jalur pensinyalan JAK-STAT. Interleukin-10 diproduksi oleh Tolerogenic dendritic cells (DCs).
IL-10 dapat menghentikan respon sel T yang berlebihan untuk mencegah peradangan kronis dan kerusakan jaringan, aktivitas penekanan Interleukin-10 dimediasi oleh heterodimeric reseptor IL-10. Walaupun kompleks reseptor IL-10 diduga terdapat pada berbagai jenis sel, terlihat yang menjadi targetnya yaitu hanya monosit dan makrofag.
Adanya gangguan aktivitas dari pensinyalan Interleukin 10 dapat menyebabkan peningkatan respon inflamasi dalam membunuh patogen yang secara teori menguntungkan karena patogen tertangani dengan cepat tetapi apabila hal ini terus berlanjut dan tidak adanya produksi Interleukin-10 maka dapat memperburuk imunopatologi dan kerusakan jaringan serta menyebabkan apoptosis sel yang mengakibatkan berbagai penyakit autoimun.
PT. Indogen sebagai distributor ELISA Kit terpercaya memiliki lini produk ELISA Kit yang berkualitas dengan harga yang bersaing dan proses cepat. Berikut merupakan list ELISA kit Interleukin-10 merk Elabscience dan Cusabio. Selain merk tersebut juga dijual Interleukin-10 ELISA kit dari merk Mybiosource, dijual kit Elisa Abcam, dijual kit Elisa Cloud Clone Corp dan dijual kit Elisa Alpco.
Spesifikasi untuk Human Interleukin-10 ELISA Kit Elabscience
ELISA Kit tersebut bisa digunakan untuk sampel serum, plasma tissue homogenates, cell lysate dan cairan biologi lainnya
●Sensitivitas: 4.69 pg/mL
●Detection Range: 7.81-500 pg/mL
●Spesifisitas: Kit ini mengenali Human Interleukin-10 dalam sampel. Tidak ada reaktivitas silang yang signifikan
●Repeatability: Koefisien variasi : <10%.
Kit ELISA ini menggunakan prinsip Sandwich-ELISA. Microwell plate ELISA yang disediakan dalam kit ini telah di coating sebelumnya dengan antibodi spesifik untuk Human Interleukin-10 juga telah ditambahkan ke dalam microwell plate tersebut. Human Interleukin-10 akan bergabung dengan antibodi spesifik kemudian Conjugate Avidin-Horseradish Peroxidase (HRP) ditambahkan berturut-turut ke setiap microwell plate dan diinkubasi.komponen yang tidak dibutuhkan dihilangkan dengan dicuci beberapa kali. Substrat ditambahkan ke setiap well, hanya well yang mengandung Human Interleukin-10, antibodi pendeteksi biotinylated dan konjugat Avidin-HRP yang akan berwarna biru. Reaksi enzim-substrat diakhiri dengan penambahan stop solution dan warnanya menjadi kuning. Optical Density (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 ± 2 nm. Nilai OD sebanding dengan konsentrasi Human Interleukin-10. Anda dapat menghitung konsentrasi Human Interleukin-10 sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.
Cara Kerja
1. Tentukan sumuran untuk diluent standard, blank dan sampel. Tambahkan 100μL setiap diluent standard, blank dan sampel ke dalam sumuran yang sesuai. Tutup plate dengan sealer yang disediakan dalam kit. Inkubasi selama 90 menit pada 37 derajat Celcius. Catatan: cairan harus ditambahkan ke bagian bawah microwell plate ELISA dengan baik, hindari menyentuh dinding bagian dalam dan menyebabkan busa sebanyak mungkin.
2. Tuang cairan dari masing-masing sumur, jangan dicuci. Segera tambahkan 100 μL larutan Biotinylated Detection Ab untuk masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 1 jam pada suhu 37 ° C.
3. Tuang larutan dari masing-masing sumuran, tambahkan 350μL wash buffer ke setiap sumuran. Rendam selama 1-2 menit dan aspirasi atau tuang larutan dari masing-masing sumuran dan tepuk kering di atas kertas penyerap. Ulangi langkah cuci ini 3 kali.
4. Tambahkan 100μL larutan HRP conjugate ke masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 30 menit pada suhu 37 ° C.
5. Tuang larutan dari setiap sumur, ulangi proses pencucian sebanyak 5 kali seperti yang dilakukan pada langkah 3.
6. Tambahkan 90μL Reagen Substrat ke setiap sumuran. Tutup dengan plate sealer baru. Inkubasi selama sekitar 15 menit pada suhu 37 ° C. Lindungi plate dari cahaya.
7. Tambahkan 50μL Stop Solution ke masing-masing sumur..
8. Tentukan Optical Density (nilai OD) dari setiap sumuran sekaligus dengan microplate reader yang diatur ke panjang gelombang 450 nm.
Referensi
Ruth, P. F dan Kaski, J. C.. 2002. Interleukin-10 and Coronary Disease. Rev Esp Cardiol 2002;55(7):738-50.
Pestka, S, et al. 2004. Interleukin-10 and Related cytokines and Receptors. Annual Review of Immunology. 22 (1): 929–79.
Shankar, S dan Cheng, G. 2012. Role of Interleukin 10 Transcriptional Regulation in Inflammation and Autoimmune Disease. Crit Rev Immunol. 2012; 32(I): 23-63.
0 Komentar