WA 0813-8792-7402 | Jual Nerve Growth Factor (NGF) ELISA Kit
Nerve Growth Factor (NGF) merupakan salah satu substansi tropik humoral yang mempengaruhi metabolisme umum sel-sel neuron, Nerve Growth Factor adalah sekresi protein yang berperan dalam proses tumbuh kembang, pemeliharaan dan daya tahan neuron. NGF merupakan kelompok subtipe dari neurotrofin. Nerve Growth Factor merupakan suatu peptida yang diproduksi oleh sel target dan efeknya bekerja setelah fase mitosis dalam proliferasi sel.
Nerve Growth Factor memiliki peran yang penting untuk masa hidup akson selama periode kompetisi memperebutkan target inervasi, selain itu Nerve Growth Factor juga mempengaruhi sintesis protein melalui beberapa tahap kontrol paksa transkripsi dan translai. Nerve Growth Factor juga berfungsi sebagai molekul transduksi sinyal seluler dan sistem kekebalan neuroendokrin. Tanpa adanya Nerve Growth Factor neuron akan mengalami apoptosis.
Nerve Growth Factor dapat mendorong ekspresi gen seperti bcl-2 dengan mengikat reseptor TrkA yang memicu proliferasi dan kelangsungan hidup neuron target, Nerve Growth Factor juga memiliki peran dalam menginduksi apoptosis pada sel beta pankreas dengan cara mensekresikan TrkA dan p75NTR NGF. Nerve Growth Factor memainkan peran penting dalam regulasi imunitas bawaan danadaptif, dalam proses peradangan Nerve Growth Factor dilepaskan dalam konsentrasi tinggi oleh sel mast dan menginduksi pertumbuhan akson di neuron nosiseptif di dekatnya. Hal ini menyebabkan peningkatan rasa sakit di daerah-daerah peradangan. Pada kekebalan adaptif, Nerve Growth Factor diproduksi oleh Thymus serta klon sel T CD4 + yang memicu kaskade pematangan sel T yang terinfeksi.
PT. Indogen sebagai distributor ELISA Kit terpercaya memiliki lini produk ELISA Kit yang berkualitas dengan harga yang bersaing dan proses cepat. Berikut merupakan list Nerve Growth Factor ELISA kit merk Elabscience Cusabio. Selain merk tersebut juga dijual Nerve Growth Factor ELISA 4 kit dari merk Mybiosource, dijual kit Elisa Abcam, dijual kit Elisa Cloud Clone Corp dan dijual kit Elisa Alpco.
Spesifikasi untuk Human Nerve Growth Factor ELISA Kit Elabscience
ELISA Kit tersebut bisa digunakan untuk sampel serum, plasma tissue homogenates, cell lysate dan cairan biologi lainnya
●Sensitivitas: 9.38 pg/mL.
●Detection Range: 15.63-1000 pg/mL
●Spesifisitas: Kit ini mengenali Human Nerve Growth Factor n dalam sampel. Tidak ada reaktivitas silang yang signifikan
●Repeatability: Koefisien variasi : <10%.
Kit ELISA ini menggunakan prinsip Sandwich-ELISA. Microwell plate ELISA yang disediakan dalam kit ini telah di coating sebelumnya dengan antibodi spesifik untuk Human Lcatoferrin juga telah ditambahkan ke dalam microwell plate tersebut. Human Nerve Growth Factor akan bergabung dengan antibodi spesifik kemudian Conjugate Avidin-Horseradish Peroxidase (HRP) ditambahkan berturut-turut ke setiap microwell plate dan diinkubasi.komponen yang tidak dibutuhkan dihilangkan dengan dicuci beberapa kali. Substrat ditambahkan ke setiap well, hanya well yang mengandung Human Nerve Growth Factor, antibodi pendeteksi biotinylated dan konjugat Avidin-HRP yang akan berwarna biru. Reaksi enzim-substrat diakhiri dengan penambahan stop solution dan warnanya menjadi kuning. Optical Density (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 ± 2 nm. Nilai OD sebanding dengan konsentrasi Human Nerve Growth Factor. Anda dapat menghitung konsentrasi Human Nerve Growth Factor sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.
Cara Kerja
1. Tentukan sumuran untuk diluent standard, blank dan sampel. Tambahkan 100Ī¼L setiap diluent standard, blank dan sampel ke dalam sumuran yang sesuai. Tutup plate dengan sealer yang disediakan dalam kit. Inkubasi selama 90 menit pada 37 derajat Celcius. Catatan: cairan harus ditambahkan ke bagian bawah microwell plate ELISA dengan baik, hindari menyentuh dinding bagian dalam dan menyebabkan busa sebanyak mungkin.
2. Tuang cairan dari masing-masing sumur, jangan dicuci. Segera tambahkan 100 Ī¼L larutan Biotinylated Detection Ab untuk masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 1 jam pada suhu 37 ° C.
3. Tuang larutan dari masing-masing sumuran, tambahkan 350Ī¼L wash buffer ke setiap sumuran. Rendam selama 1-2 menit dan aspirasi atau tuang larutan dari masing-masing sumuran dan tepuk kering di atas kertas penyerap. Ulangi langkah cuci ini 3 kali.
4. Tambahkan 100Ī¼L larutan HRP conjugate ke masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 30 menit pada suhu 37 ° C.
5. Tuang larutan dari setiap sumur, ulangi proses pencucian sebanyak 5 kali seperti yang dilakukan pada langkah 3.
6. Tambahkan 90Ī¼L Reagen Substrat ke setiap sumuran. Tutup dengan plate sealer baru. Inkubasi selama sekitar 15 menit pada suhu 37 ° C. Lindungi plate dari cahaya.
7. Tambahkan 50Ī¼L Stop Solution ke masing-masing sumur..
8. Tentukan Optical Density (nilai OD) dari setiap sumuran sekaligus dengan microplate reader yang diatur ke panjang gelombang 450 nm.
Referensi
Jessel, T. M., Sanes, J. R. dan Shepherd, G. M. 1988. Neurobiology 2nd edition. Ney York : Oxford University Press.
Lee, R., Kermani, P et al. 2001. Regulation of cell survival by secreted proneurotrophins. Science. 294 (5548): 1945–8.
Puspitawati, R. 2004. Neurogenesis dan Faktor-Faktor yang Berpengaruh. IJD. 11 (3).
0 Komentar