WA 0813-8792-7402 | Jual Lactoferrin (LF) ELISA Kit
Lactoferrin (atau lactotransfer rin) adalah suatu glikoprotein globular yang didasarkan pada satu rantai polipeptida yang mengandung sekitar 700 asam amino dan membentuk dua domain globular homolog bernama N-dan C-lobus. Lactoferrin dapat meningkatkan, mentransfer ion besi (Fe3+) dan mengendalikan tingkat zat besi bebas dalam darah dan sekresi eksternal, lactoferrin ini memiliki jumlah yang tinggi di dalam susu, kolostrum dan dapat ditemukan juga pada neutrofil, ginjal, sel epitel, dan pada cairan mukosa (saliva, air mata, sekresi usus kecil, sekresi vagina, dan sebagainya). Laktoferin memiliki berat molekul sebesar 82.600 Da dan dapat mengikat dua atom perifer molekulnya.
Setiap molekul lactoferrin dapat mengikat dua ion besi, seng, tembaga atau logam lainnya secara reversibel. Setiap ion terikat dengan enam ligan: empat dari rantai polipeptida (dua residu tirosin, satu residu histidin dan satu residu asam aspartat) dan dua ion dari ion karbonat atau bikarbonat. Baik dalam plasma darah dan dalam cairan sekresi laktoferin dapat dalam berbagai bentuk polimer mulai dari monomer hingga tetramer. Laktoferin cenderung mempolimerisasi in vitro dan in vivo terutama pada konsentrasi tinggi.
Lactoferrin memiliki aktivitas antimikroba (bakterisida, fungisida) antivirus, antiparasit, katalitik, anti kanker, serta fungsi dan sifat anti alergi yang sangat kuat karena memiliki kemampuan mengikat ion logam yang sangat penting bagi makhluk hidup dan merupakan bagian dari pertahanan bawaan terutama pada mukosa. Lactoferrin berinteraksi dengan DNA dan RNA, polisakarida, dan heparin, dan menunjukkan beberapa fungsi biologisnya. Laktoferin terbukti memiliki efek positif pada formasi tulang yang membantu mengurangi resorpsi tulang dan meningkatkan pembentukan tulang.
PT. Indogen sebagai distributor ELISA Kit terpercaya memiliki lini produk ELISA Kit yang berkualitas dengan harga yang bersaing dan proses cepat. Berikut merupakan list Lactoferrin ELISA kit merk Elabscience Cusabio. Selain merk tersebut juga dijual Lactoferrin ELISA 4 kit dari merk Mybiosource, dijual kit Elisa Abcam, dijual kit Elisa Cloud Clone Corp dan dijual kit Elisa Alpco.
Spesifikasi untuk Human Lactoferrin ELISA Kit Elabscience
ELISA Kit tersebut bisa digunakan untuk sampel serum, plasma tissue homogenates, cell lysate dan cairan biologi lainnya
●Sensitivitas: 0.19 ng/mL.
●Detection Range: 0.31-20 ng/mL
●Spesifisitas: Kit ini mengenali Human Lactoferrin dalam sampel. Tidak ada reaktivitas silang yang signifikan
●Repeatability: Koefisien variasi : <10%.
Kit ELISA ini menggunakan prinsip Sandwich-ELISA. Microwell plate ELISA yang disediakan dalam kit ini telah di coating sebelumnya dengan antibodi spesifik untuk Human Lcatoferrin juga telah ditambahkan ke dalam microwell plate tersebut. Human Lactoferrin akan bergabung dengan antibodi spesifik kemudian Conjugate Avidin-Horseradish Peroxidase (HRP) ditambahkan berturut-turut ke setiap microwell plate dan diinkubasi.komponen yang tidak dibutuhkan dihilangkan dengan dicuci beberapa kali. Substrat ditambahkan ke setiap well, hanya well yang mengandung Human Lactoferrin, antibodi pendeteksi biotinylated dan konjugat Avidin-HRP yang akan berwarna biru. Reaksi enzim-substrat diakhiri dengan penambahan stop solution dan warnanya menjadi kuning. Optical Density (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 ± 2 nm. Nilai OD sebanding dengan konsentrasi Human Lactoferrin. Anda dapat menghitung konsentrasi Human Lactoferrin sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.
Cara Kerja
1. Tentukan sumuran untuk diluent standard, blank dan sampel. Tambahkan 100Ī¼L setiap diluent standard, blank dan sampel ke dalam sumuran yang sesuai. Tutup plate dengan sealer yang disediakan dalam kit. Inkubasi selama 90 menit pada 37 derajat Celcius. Catatan: cairan harus ditambahkan ke bagian bawah microwell plate ELISA dengan baik, hindari menyentuh dinding bagian dalam dan menyebabkan busa sebanyak mungkin.
2. Tuang cairan dari masing-masing sumur, jangan dicuci. Segera tambahkan 100 Ī¼L larutan Biotinylated Detection Ab untuk masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 1 jam pada suhu 37 ° C.
3. Tuang larutan dari masing-masing sumuran, tambahkan 350Ī¼L wash buffer ke setiap sumuran. Rendam selama 1-2 menit dan aspirasi atau tuang larutan dari masing-masing sumuran dan tepuk kering di atas kertas penyerap. Ulangi langkah cuci ini 3 kali.
4. Tambahkan 100Ī¼L larutan HRP conjugate ke masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 30 menit pada suhu 37 ° C.
5. Tuang larutan dari setiap sumur, ulangi proses pencucian sebanyak 5 kali seperti yang dilakukan pada langkah 3.
6. Tambahkan 90Ī¼L Reagen Substrat ke setiap sumuran. Tutup dengan plate sealer baru. Inkubasi selama sekitar 15 menit pada suhu 37 ° C. Lindungi plate dari cahaya.
7. Tambahkan 50Ī¼L Stop Solution ke masing-masing sumur..
8. Tentukan Optical Density (nilai OD) dari setiap sumuran sekaligus dengan microplate reader yang diatur ke panjang gelombang 450 nm.
Referensi
Adlerova, L., Bartoskova, A dan Faldyna, M. 2008. Lactoferrin: a review . Veterinarni Medicina. 53 (9): 457–468.
Kang, J. F., Li, X. L et al. 2008. Bioinformatics analysis of lactoferrin gene for several species. Biochemical Genetics. 46 (5–6): 312–22.
SĆ”nchez, L., Calvo, M dan Brock, J. H. 1992. Biological role of lactoferrin. Archives of Disease in Childhood. 67 (5): 657–61.
0 Komentar