WA 0813-8792-7402 | Jual FNDC5 ELISA Kit
Fibronectin type III domain-containing 5 (FNDC5) protein adalah adalah protein yang dikodekan oleh gen FNDC5, FNDC5 ini merupakan prekursor dari hormon irisin yang dikenal sebagai hormon olahraga di bidang kesehatan. FNDC5 juga merupakan protein yang terdiri dari domain sitoplasma pendek, segmen transmembran, dan terdiri dari 100 kDa fibronectin tipe III (FNIII).
Pada manusia, FNDC5 banyak ditemukan di otot lurik dan organ lain yang mempunyai otot seperti rektum, hati dan lidah. Sementara itu FNDC5 sedikit ditemukan di organ pankreas yang mana merupakan organ yang melakkan proes homeostasis glukosa. Ekspresi FNDC5 di jaringan adiposa 100-200 kali lebih rendah daripada di otot lurik, gen FNDC5 ini mengkodekan prohormon yang dipicu oleh latihan otot kemudian menghasika irisin. Produksi FNDC5 ini akan lebih banyak ketika ada PGC-1 alpha yang dipicu oleh aktivitas otot saat olahraga dengan durasi yang lama, peningkatan FNDC5 juga diakibatkan oleh faktor lainnya seperti inhibisi protein SMAD3 yang berperan dalam menekan produksi irisin
Pembahasan FNDC5 tidak akan jauh dari hormon irisin, Irisin dilepaskan oleh otot ke dalam darah melalui proses pemecahan (proteolisis) protein transmembran FNDC5. Irisin berpotensi dalam memediasi efek pencoklatan pada jaringan adiposa putih. Dengan adanya perubahan warna ini mengakibatkan proses perubahan lemak menjadi energi akan jauh lebih besar dan sangat bermanfaat untuk pembakaran lemak di dalam tubuh.
Penelitian yang berhubungan dengan FNDC5 ini lebih pada penentuan aktivitas otot terutama dalam bidang exercise medicine, biasanya sampel yang digunakan adalah manusia yang diberikan perlakuan olahraga tertentu dan juga hewan uji seperti tikus. PT. Indogen sebagai distributor ELISA Kit terpercaya memiliki lini produk ELISA Kit yang berkualitas dengan harga yang bersaing dan proses cepat. Berikut merupakan list FNDC5 ELISA kit merk Elabscience dan Cusabio. Selain merk tersebut juga dijual kit Elisa FNDC5 dari merk My Biosource, dijual kit Elisa Abcam, dijual kit Elisa Cloud Clone Corp dan dijual kit Elisa Alpco.
Spesifikasi untuk Human FNDC5 ELISA Kit Elabscience
ELISA Kit tersebut bisa digunakan untuk sampel serum, plasma tissue homogenates, cell lysate dan cairan biologi lainnya
●Sensitivitas: 0.10 ng/mL.
●Detection Range: 0.16-10 ng/mL
●Spesifisitas: Kit ini mengenali Human FNDC5 dalam sampel. Tidak ada reaktivitas silang yang signifikan
●Repeatability: Koefisien variasi : <10%.
Kit ELISA ini menggunakan prinsip Sandwich-ELISA. Microwell plate ELISA yang disediakan dalam kit ini telah dicoating sebelumnya dengan antibodi spesifik untuk Human FNDC5. Sampel (atau Standar) dan antibodi pendeteksi biotinilasi khusus untuk Human FNDC5 juga telah ditambahkan ke dalam microwell plate tersebut. Human FNDC5 akan bergabung dengan antibodi spesifik kemudian Conjugate Avidin-Horseradish Peroxidase (HRP) ditambahkan berturut-turut ke setiap microwell plate dan diinkubasi.komponen yang tidak dibutuhkan dihilangkan dengan dicuci beberapa kali. Substrat ditambahkan ke setiap well, hanya well yang mengandung Human FNDC5, antibodi pendeteksi biotinylated dan konjugat Avidin-HRP yang akan berwarna biru. Reaksi enzim-substrat diakhiri dengan penambahan stop solution dan warnanya menjadi kuning. Optical Density (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 ± 2 nm. Nilai OD sebanding dengan konsentrasi Human FNDC5. Anda dapat menghitung konsentrasi Human FNDC5 sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.
Cara Kerja
1. Tentukan sumuran untuk diluent standard, blank dan sampel. Tambahkan 100μL setiap diluent standard, blank dan sampel ke dalam sumuran yang sesuai. Tutup plate dengan sealer yang disediakan dalam kit. Inkubasi selama 90 menit pada 37 derajat Celcius. Catatan: cairan harus ditambahkan ke bagian bawah microwell plate ELISA dengan baik, hindari menyentuh dinding bagian dalam dan menyebabkan busa sebanyak mungkin.
2. Tuang cairan dari masing-masing sumur, jangan dicuci. Segera tambahkan 100 μL larutan Biotinylated Detection Ab untuk masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 1 jam pada suhu 37 ° C.
3. Tuang larutan dari masing-masing sumuran, tambahkan 350μL wash buffer ke setiap sumuran. Rendam selama 1-2 menit dan aspirasi atau tuang larutan dari masing-masing sumuran dan tepuk kering di atas kertas penyerap. Ulangi langkah cuci ini 3 kali.
4. Tambahkan 100μL larutan HRP conjugate ke masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 30 menit pada suhu 37 ° C.
5. Tuang larutan dari setiap sumur, ulangi proses pencucian sebanyak 5 kali seperti yang dilakukan pada langkah 3.
6. Tambahkan 90μL Reagen Substrat ke setiap sumuran. Tutup dengan plate sealer baru. Inkubasi selama sekitar 15 menit pada suhu 37 ° C. Lindungi plate dari cahaya.
7. Tambahkan 50μL Stop Solution ke masing-masing sumur..
8. Tentukan Optical Density (nilai OD) dari setiap sumuran sekaligus dengan microplate reader yang diatur ke panjang gelombang 450 nm.
Referensi
Chen, N., Li, Q. et al. 2016. an induced myokine as a metabolic regulator: an updated narrative review. Diabetes Metab Res Rev. 2016;32(1):51–9
Uda’a, B. 2018. Perbandingan Kadar Irisin Serum Laki-Laki Muda Sehat Tidak Terlatih pada Latihan Treadmill Intensitas Sedang dengan Peningkatan Kecepatan Bertahap dan Peningkatan Inklinasi Bertahap. Tesis. Universitas Airlangga.
0 Komentar