WA 0813-8792-7402 | Jual NSE(Neuron Specific Enolase) ELISA Kit
Neuron Specific Enolase (NSE/Enolase 2) adalah enzim yang pada manusia dikodekan oleh gen ENO2. Neuron Specific Enolase merupakan hydratase phospho pyruvate dan salah satu dari tiga isoenzim enolase yang ditemukan pada mamalia. Neuron Specific Enolase ditemukan pada neuron dewasa dan sel-sel asal neuron.
Neuron Specific Enolase merupakan penanda untuk neuron dan sel neuroendokrin perifer yang ada sebagai isozim dimerik γγ atau αγ. Bentuk γγ Neuron Specific Enolase diekspresikan dalam neuron, bentuk αγ diekspresikan dalam mikroglia, oligodendrosit, dan astrosit. Neuron Specific Enolase dapat merangsang aktivitas inflamasi dan neurotropik yang mengatur pertumbuhan, diferensiasi, kelangsungan hidup, dan kematian neuron.
Neuron Specific Enolase dalam darah dan cairan serebrospinal dapat menjadi biomarker yang berpotensi untuk menilai kerusakan saraf dan prognosis cedera otak. Jumlah Neuron Specific Enolase lebih tinggi terdeteksi pada materi abu-abu otak orang dewasa, sedangkan kadar Neuron Specific Enolase yang lebih rendah terdapat dalam materi putih. Neuron Specific Enolase telah terlibat dalam beberapa penyakit seperti iskemia, hipoksia, dan beragam penyakit metabolik, proliferatif, inflamasi, autoimun, dan neurodegeneratif . Hilangnya neuron dan koneksi sinaptik secara bertahap adalah gambaran umum dari gangguan neurodegeneratif dimana jumlah neuron yang hilang berhubungan dengan peningkatan kadar Neuron Specific Enolase dalam serum.
Walaupun Neuron Specific Enolase dianggap sebagai molekul penting yang menilai kerusakan neuron namun Neuron Specific Enolase juga terlibat dalam perbaikan neuron. Neuron Specific Enolase telah terbukti dapat mengendalikan kelangsungan hidup neuron, diferensiasi, dan regenerasi neurit dengan mengaktifkan jalur pensinyalan PI3K / Akt dan MAPK / ERK.
PT. Indogen sebagai distributor ELISA Kit terpercaya memiliki lini produk ELISA Kit yang berkualitas dengan harga yang bersaing dan proses cepat. Berikut merupakan list Neuron Specific Enolase ELISA kit merk Elabscience dan Cusabio. Selain merk tersebut juga dijual Neuron Specific Enolase ELISA kit dari merk Mybiosource, dijual kit Elisa Abcam, dijual kit Elisa Cloud Clone Corp dan dijual kit Elisa Alpco.
Spesifikasi untuk Human Neuron Specific Enolase ELISA Kit Elabscience
ELISA Kit tersebut bisa digunakan untuk sampel serum, plasma dan cairan biologi lainnya
●Sensitivitas: 1.40 ng/mL
●Detection Range: 2.34~150 ng/mL
●Spesifisitas: Kit ini mengenali Human Neuron Specific Enolase dalam sampel. Tidak ada reaktivitas silang yang signifikan
●Repeatability: Koefisien variasi : <10%.
Kit ELISA ini menggunakan prinsip Sandwich-ELISA. Microwell plate ELISA yang disediakan dalam kit ini telah di coating sebelumnya dengan antibodi spesifik untuk Human Lcatoferrin juga telah ditambahkan ke dalam microwell plate tersebut. Human Neuron Specific Enolase akan bergabung dengan antibodi spesifik kemudian Conjugate Avidin-Horseradish Peroxidase (HRP) ditambahkan berturut-turut ke setiap microwell plate dan diinkubasi.komponen yang tidak dibutuhkan dihilangkan dengan dicuci beberapa kali. Substrat ditambahkan ke setiap well, hanya well yang mengandung Human Neuron Specific Enolase, antibodi pendeteksi biotinylated dan konjugat Avidin-HRP yang akan berwarna biru. Reaksi enzim-substrat diakhiri dengan penambahan stop solution dan warnanya menjadi kuning. Optical Density (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 ± 2 nm. Nilai OD sebanding dengan konsentrasi Human Neuron Specific Enolase. Anda dapat menghitung konsentrasi Human Neuron Specific Enolase sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.
Cara Kerja
1. Tentukan sumuran untuk diluent standard, blank dan sampel. Tambahkan 100μL setiap diluent standard, blank dan sampel ke dalam sumuran yang sesuai. Tutup plate dengan sealer yang disediakan dalam kit. Inkubasi selama 90 menit pada 37 derajat Celcius. Catatan: cairan harus ditambahkan ke bagian bawah microwell plate ELISA dengan baik, hindari menyentuh dinding bagian dalam dan menyebabkan busa sebanyak mungkin.
2. Tuang cairan dari masing-masing sumur, jangan dicuci. Segera tambahkan 100 μL larutan Biotinylated Detection Ab untuk masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 1 jam pada suhu 37 ° C.
3. Tuang larutan dari masing-masing sumuran, tambahkan 350μL wash buffer ke setiap sumuran. Rendam selama 1-2 menit dan aspirasi atau tuang larutan dari masing-masing sumuran dan tepuk kering di atas kertas penyerap. Ulangi langkah cuci ini 3 kali.
4. Tambahkan 100μL larutan HRP conjugate ke masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 30 menit pada suhu 37 ° C.
5. Tuang larutan dari setiap sumur, ulangi proses pencucian sebanyak 5 kali seperti yang dilakukan pada langkah 3.
6. Tambahkan 90μL Reagen Substrat ke setiap sumuran. Tutup dengan plate sealer baru. Inkubasi selama sekitar 15 menit pada suhu 37 ° C. Lindungi plate dari cahaya.
7. Tambahkan 50μL Stop Solution ke masing-masing sumur..
8. Tentukan Optical Density (nilai OD) dari setiap sumuran sekaligus dengan microplate reader yang diatur ke panjang gelombang 450 nm.
Referensi
Egea-Guerrero J.J. et al. 2014. An Experimental Model of Mass-Type Brain Damage in The Rat: Expression of Brain Damage Based on Neurospecific Enolase and Protein S100B). Med. Intensiv. 38:218–225.
Hafner A. et al. 2013. Neuroprotective Role of Gamma-Enolase in Microglia in a Mouse Model of Alzheimer’s Disease is Regulated by Cathepsin X. Aging Cell. 12:604–614.
Kleine, T. O., Benes, L. dan Zofel P. 2003. Studies of The Brain Specificity of S100B and Neuron-Specific Enolase (NSE) in Blood Serum of Acute Care Patients. Brain Res. Bull. 61:265–279.
0 Komentar