WA 0813-8792-7402 | Jual JUAL Human VEGF-B (Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit
Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) adalah salah satu regulator penting pada pembentukan pembuluh darah embrio dan juga pada orang dewasa . Mamalia memiliki 5 ligan VEGF yang berbeda. Ligan ini kemudian akan berikatan dengan tiga reseptor tyrosine kinase yang kemudian dikenal sebagai VEGFR-1,-2, dan -3 demikian pula dengan co-reseptor seperti Heparan Sulphate Proteoglycan (HSPG) dan neuropillin-1 dan -2. VEGF adalah bagian dari reseptor tirosin kinase. VEGF ekstraseluler terdiri dari 750 asam membentuk 7 immunoglobulin loops. Walaupun sebagian besar VEGF terekspresi pada sel endotel, beberapa ekspresinya juga ditemukan pada sel non-endothelial. Namun fungsi utama VEGF adalah pada sistem vaskular.
Vascular Endothelial Growth Factor B (VEGF-B) adalah suatu protein pada manusia dikodekan oleh gen VEGF-B. VEGF-B adalah faktor pertumbuhan yang termasuk dalam golongan VEGF seperti VEGF-A. Gen VEGF-B manusia memiliki panjang 4.000 bp, memiliki delapan ekson dan enam intron dan terletak pada kromosom 11. Faktor pertumbuhan, prostaglandin E2 atau hormon steroid tidak menginduksi ekspresi VEGF-B.
Pada tikus dewasa, ekspresi VEGF-B paling tinggi berada di jantung, otot rangka dan diafragma memiliki tingkat ekspresi yang lebih rendah di berbagai jaringan lain. Ekspresi gen VEGF-B dimulai sejak awal perkembangan janin tikus.
Berbeda dengan VEGF-A, VEGF-B memainkan peran yang kurang menonjol dalam sistem peredaran darah. VEGF-B lebih memainkan peran hanya dalam pemeliharaan pembuluh darah yang baru terbentuk selama kondisi patologis, VEGF-B memainkan peran penting pada beberapa jenis neuron terutama perlindungan neuron di retina dan korteks serebral selama stroke. VEGF-B juga diketahui mengendalikan penyerapan endotel dan asam lemak di jantung dan otot rangka.
PT. Indogen sebagai distributor ELISA Kit terpercaya memiliki lini produk ELISA Kit yang berkualitas dengan harga yang bersaing dan proses cepat. Berikut merupakan list ELISA kit Vascular endothelial growth factor B merk Elabscience dan Cusabio. Selain merk tersebut juga dijual Vascular endothelial growth factor B ELISA kit dari merk Mybiosource, dijual kit Elisa Abcam, dijual kit Elisa Cloud Clone Corp dan dijual kit Elisa Alpco.
Spesifikasi untuk Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B ELISA Kit Elabscience
ELISA Kit tersebut bisa digunakan untuk sampel serum, plasma tissue homogenates, cell lysate dan cairan biologi lainnya
●Sensitivitas: 9.38 pg/mL
●Detection Range: 15.63-1000 pg/mL
●Spesifisitas: Kit ini mengenali Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B dalam sampel. Tidak ada reaktivitas silang yang signifikan
●Repeatability: Koefisien variasi : <10%.
Kit ELISA ini menggunakan prinsip Sandwich-ELISA. Microwell plate ELISA yang disediakan dalam kit ini telah di coating sebelumnya dengan antibodi spesifik untuk Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B juga telah ditambahkan ke dalam microwell plate tersebut. Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B akan bergabung dengan antibodi spesifik kemudian Conjugate Avidin-Horseradish Peroxidase (HRP) ditambahkan berturut-turut ke setiap microwell plate dan diinkubasi.komponen yang tidak dibutuhkan dihilangkan dengan dicuci beberapa kali. Substrat ditambahkan ke setiap well, hanya well yang mengandung Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B, antibodi pendeteksi biotinylated dan konjugat Avidin-HRP yang akan berwarna biru. Reaksi enzim-substrat diakhiri dengan penambahan stop solution dan warnanya menjadi kuning. Optical Density (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 ± 2 nm. Nilai OD sebanding dengan konsentrasi Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B. Anda dapat menghitung konsentrasi Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.
Cara Kerja
1. Tentukan sumuran untuk diluent standard, blank dan sampel. Tambahkan 100Ī¼L setiap diluent standard, blank dan sampel ke dalam sumuran yang sesuai. Tutup plate dengan sealer yang disediakan dalam kit. Inkubasi selama 90 menit pada 37 derajat Celcius. Catatan: cairan harus ditambahkan ke bagian bawah microwell plate ELISA dengan baik, hindari menyentuh dinding bagian dalam dan menyebabkan busa sebanyak mungkin.
2. Tuang cairan dari masing-masing sumur, jangan dicuci. Segera tambahkan 100 Ī¼L larutan Biotinylated Detection Ab untuk masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 1 jam pada suhu 37 ° C.
3. Tuang larutan dari masing-masing sumuran, tambahkan 350Ī¼L wash buffer ke setiap sumuran. Rendam selama 1-2 menit dan aspirasi atau tuang larutan dari masing-masing sumuran dan tepuk kering di atas kertas penyerap. Ulangi langkah cuci ini 3 kali.
4. Tambahkan 100Ī¼L larutan HRP conjugate ke masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 30 menit pada suhu 37 ° C.
5. Tuang larutan dari setiap sumur, ulangi proses pencucian sebanyak 5 kali seperti yang dilakukan pada langkah 3.
6. Tambahkan 90Ī¼L Reagen Substrat ke setiap sumuran. Tutup dengan plate sealer baru. Inkubasi selama sekitar 15 menit pada suhu 37 ° C. Lindungi plate dari cahaya.
7. Tambahkan 50Ī¼L Stop Solution ke masing-masing sumur..
8. Tentukan Optical Density (nilai OD) dari setiap sumuran sekaligus dengan microplate reader yang diatur ke panjang gelombang 450 nm.
Referensi
Li, Y, Zhang, F, et al. 2008. VEGF-B Inhibits Apoptosis Via VEGFR-1-Mediated Suppression of the Expression of BH3-Only Protein Genes in Mice and Rats. J. Clin. Invest. 118 (3): 913–23.
Sun, Y, Jin, K, et al. 2004. Increased Severity of Cerebral Ischemic Injury in Vascular Endothelial Growth Factor-B-Deficient Mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24 (10): 1146–52.
Zhang, F, Tang, Z et al. 2009. VEGF-B is Dispensable for Blood Vessel Growth but Critical for Their Survival, and VEGF-B Targeting Inhibits Pathological Angiogenesis. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106 (15): 6152–7.
0 Komentar