WA 0813-8792-7402 | Jual Glucagon Like Peptide-1 (GLP-1)ELISA Kit
Glucagon Like Peptide-1 (GLP-1) merupakan hormon peptida yang terdapat di dalam saluran pencernaan dari produk transkripsi gen proglukagon, dan digolongkan sebagai inkretin. GLP-1 aktif menyusun dua α-heliks dari posisi asam amino 13-20 dan 24-35 yang dipisahkan oleh daerah penghubung. Reseptor Glucagon Like Peptide-1 predominan terdapat pada sel beta walau terdapat pula pada sel alfa pankreas dan sel jaringan lain. Hormon ini hanya bekerja pada keadaan konsentrasi glukosa yang berada diatas konsentrasi basal.
Setelah selesai makan, Glucagon Like Peptide-1 akan disekresikan yang akan berikatan dengan reseptornya kemudian mengatur ekspresi gen sel beta dengan menghambat apoptosis sel beta, mencegah glukolipotoksisitas, dan memperbaiki fungsi sel beta. Glucagon Like Peptide-1 juga bekerja dengan menekan pelepasan glukagon dan menurunkan produksi glukosa hati, memperlambat waktu pengosongan lambung dan sekresi asam, sehingga mengurangi nafsu makan dan berkontribusi terhadap penurunan berat badan, menstimulasi sekresi insulin dari kelenjar pankreas, memiliki efek proteksperlindungani terhadap sel β-pankreas, serta menghambat pengeluaran hormon glukagon sehingga dapat mengontrol kadar glukosa darah.
Glucagon Like Peptide-1 yang dihasilkan oleh tubuh jangka waktu bertahannya terbatas karena waktu paruhnya yang sangat singkat yakni kurang dari 2 menit, hal ini karena Glucagon Like Peptide-1 didegradasi dengan cepat oleh enzim (DPP-4). Dalam ilmu kesehatan, Glucagon Like Peptide-1 ini dijadikan sebagai salah satu pengobatan untuk penderita diabetes melitus dengan cara membuat pankreas lebih reaktif terhadap glukosa darah dan meningkatkan sekresi insulin, menurunkan sekresi glukagon dari sel al[ha pankreas, meningkatkan massa sel ß dan ekspresi gen insulin dan menekan sekresi asam lambung dan kadar gas lambung.
Dalam penelitian Glucagon Like Peptide-1 biasanya berhubungan dengan penelitian diabetes dan basaya dilakukan uji pada hewan tikus atau mencit. PT. Indogen sebagai distributor ELISA Kit terpercaya memiliki lini produk ELISA Kit yang berkualitas dengan harga yang bersaing dan proses cepat. Berikut merupakan list Glucagon Like Peptide-1 ELISA kit merk Elabscience dan Cusabio. Selain merk tersebut juga dijual kit Elisa Glucagon Like Peptide-1 dari merk My Biosource, dijual kit Elisa Abcam, dijual kit Elisa Cloud Clone Corp dan dijual kit Elisa Alpco.
Spesifikasi untuk Human Glucagon Like Peptide-1 ELISA Kit Elabscience
ELISA Kit tersebut bisa digunakan untuk sampel serum, plasma tissue homogenates, cell lysate dan cairan biologi lainnya
●Sensitivitas: 0.94pg/mL.
●Detection Range: 1.56-100pg/mL
●Spesifisitas: Kit ini mengenali Human Glucagon Like Peptide-1 dalam sampel. Tidak ada reaktivitas silang yang signifikan
●Repeatability: Koefisien variasi : <10%.
Kit ELISA ini menggunakan prinsip Sandwich-ELISA. Microwell plate ELISA yang disediakan dalam kit ini telah di coating sebelumnya dengan antibodi spesifik untuk Human Glucagon Like Peptide-1.Sampel (atau Standar) dan antibodi pendeteksi biotinilasi khusus untuk Human Glucagon Like Peptide-1 juga telah ditambahkan ke dalam microwell plate tersebut. Human Glucagon Like Peptide-1 akan bergabung dengan antibodi spesifik kemudian Conjugate Avidin-Horseradish Peroxidase (HRP) ditambahkan berturut-turut ke setiap microwell plate dan diinkubasi.komponen yang tidak dibutuhkan dihilangkan dengan dicuci beberapa kali. Substrat ditambahkan ke setiap well, hanya well yang mengandung Human Glucagon Like Peptide-1, antibodi pendeteksi biotinylated dan konjugat Avidin-HRP yang akan berwarna biru. Reaksi enzim-substrat diakhiri dengan penambahan stop solution dan warnanya menjadi kuning. Optical Density (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 ± 2 nm. Nilai OD sebanding dengan konsentrasi Human Glucagon Like Peptide-1. Anda dapat menghitung konsentrasi Human Glucagon Like Peptide-1 sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.
Cara Kerja
1. Tentukan sumuran untuk diluent standard, blank dan sampel. Tambahkan 100μL setiap diluent standard, blank dan sampel ke dalam sumuran yang sesuai. Tutup plate dengan sealer yang disediakan dalam kit. Inkubasi selama 90 menit pada 37 derajat Celcius. Catatan: cairan harus ditambahkan ke bagian bawah microwell plate ELISA dengan baik, hindari menyentuh dinding bagian dalam dan menyebabkan busa sebanyak mungkin.
2. Tuang cairan dari masing-masing sumur, jangan dicuci. Segera tambahkan 100 μL larutan Biotinylated Detection Ab untuk masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 1 jam pada suhu 37 ° C.
3. Tuang larutan dari masing-masing sumuran, tambahkan 350μL wash buffer ke setiap sumuran. Rendam selama 1-2 menit dan aspirasi atau tuang larutan dari masing-masing sumuran dan tepuk kering di atas kertas penyerap. Ulangi langkah cuci ini 3 kali.
4. Tambahkan 100μL larutan HRP conjugate ke masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 30 menit pada suhu 37 ° C.
5. Tuang larutan dari setiap sumur, ulangi proses pencucian sebanyak 5 kali seperti yang dilakukan pada langkah 3.
6. Tambahkan 90μL Reagen Substrat ke setiap sumuran. Tutup dengan plate sealer baru. Inkubasi selama sekitar 15 menit pada suhu 37 ° C. Lindungi plate dari cahaya.
7. Tambahkan 50μL Stop Solution ke masing-masing sumur..
8. Tentukan Optical Density (nilai OD) dari setiap sumuran sekaligus dengan microplate reader yang diatur ke panjang gelombang 450 nm.
Referensi
Sakinah, E. N. 2018. Peningkatan Kadar Glucagon Like Peptide-1(GLP-1) Pada Tikus Model Diabetes setelah Pemberian diit Resistant Starch Tipe 3 Pati Singkong (Manihot Esculanta Crantz). Journal of Agromedicine and Medical Sciences. Vol. 4 No. 2 : 116-120.
Toft-Nielsen M, Madsbad S, Holst J. 2001. Determinants of the effectiveness of glucagon-like peptide-1 in type 2 diabetes. J Clin Endocrinol Metab. 86 (8): 3853–60.
0 Komentar