WA 0813-8792-7402 | JUAL Human ERα (Estrogen Receptor Alpha) ELISA Kit
Estrogen receptor alpha (ERα), juga dikenal sebagai NR3A1 adalah salah satu dari dua jenis utama reseptor estrogen selain Estrogen receptor beta, reseptor nuklear yang diaktifkan oleh hormon seks estrogen. Pada manusia, ERα dikodekan oleh gen ESR1 (EStrogen Receptor 1).
Estrogen Receptor Alpha berperan dalam perkembangan fisiologis dan fungsi berbagai sistem organ diantaranya sistem reproduksi, sistem saraf pusat, kerangka, dan kardiovaskular. Estrogen Receptor Alpha diekspresikan secara luas ke seluruh tubuh terutama di uterus dan ovarium, organ reproduksi pria, kelenjar susu, tulang, jantung, hipotalamus, kelenjar pituitari, hati, paru-paru, ginjal, limpa, dan jaringan adiposa.
Estrogen Receptor Alpha sangat penting dalam pematangan fenotip reproduksi wanita, Aktivasi Estrogen Receptor Alpha diketahui memicu proliferasi sel di dalam rahim. Estrogen Receptor Alpha memediasi mitosis dan diferensiasi dalam uterus sebagai respons terhadap stimulasi estrogen. Dengan tidak adanya Estrogen Receptor Alpha, estrogen tidak lagi dapat melakukan umpan balik negatif pada hipotalamus dan menghasilkan kadar LH yang meningkat secara drastis dan stimulasi ovarium yang konstan.
Pensinyalan estrogen melalui Estrogen Receptor Alpha bertanggung jawab dalam berbagai aspek perkembangan sistem saraf pusat seperti sinaptogenesis dan remodeling sinaptik. Estrogen Receptor Alpha ditemukan di hipotalamus, preoptik, dan nukleus arkuata, ketiganya telah dikaitkan dengan perilaku reproduksi, dan maskulinisasi melalui fungsi Estrogen Receptor Alpha.
PT. Indogen sebagai distributor ELISA Kit terpercaya memiliki lini produk ELISA Kit yang berkualitas dengan harga yang bersaing dan proses cepat. Berikut merupakan list ELISA kit Estrogen Receptor Alpha merk Elabscience. Selain merk tersebut juga dijual Estrogen Receptor Alpha ELISA kit dari merk Mybiosource, dijual kit Elisa Abcam, dijual kit Elisa Cloud Clone Corp dan dijual kit Elisa Alpco.
Spesifikasi untuk Human Estrogen Receptor Alpha ELISA Kit Elabscience
ELISA Kit tersebut bisa digunakan untuk sampel serum, plasma tissue homogenates, cell lysate dan cairan biologi lainnya
●Sensitivitas: 37.50 pg/mL
●Detection Range: 62.50-4000 pg/mL
●Spesifisitas: Kit ini mengenali Human Estrogen Receptor Alpha dalam sampel. Tidak ada reaktivitas silang yang signifikan
●Repeatability: Koefisien variasi : <10%.
Kit ELISA ini menggunakan prinsip Sandwich-ELISA. Microwell plate ELISA yang disediakan dalam kit ini telah di coating sebelumnya dengan antibodi spesifik untuk Human Lcatoferrin juga telah ditambahkan ke dalam microwell plate tersebut. Human Estrogen Receptor Alpha akan bergabung dengan antibodi spesifik kemudian Conjugate Avidin-Horseradish Peroxidase (HRP) ditambahkan berturut-turut ke setiap microwell plate dan diinkubasi.komponen yang tidak dibutuhkan dihilangkan dengan dicuci beberapa kali. Substrat ditambahkan ke setiap well, hanya well yang mengandung Human Estrogen Receptor Alpha, antibodi pendeteksi biotinylated dan konjugat Avidin-HRP yang akan berwarna biru. Reaksi enzim-substrat diakhiri dengan penambahan stop solution dan warnanya menjadi kuning. Optical Density (OD) diukur secara spektrofotometri pada panjang gelombang 450 ± 2 nm. Nilai OD sebanding dengan konsentrasi Human Estrogen Receptor Alpha. Anda dapat menghitung konsentrasi Human Estrogen Receptor Alpha sampel dengan membandingkan OD sampel dengan kurva standar.
Cara Kerja
1. Tentukan sumuran untuk diluent standard, blank dan sampel. Tambahkan 100μL setiap diluent standard, blank dan sampel ke dalam sumuran yang sesuai. Tutup plate dengan sealer yang disediakan dalam kit. Inkubasi selama 90 menit pada 37 derajat Celcius. Catatan: cairan harus ditambahkan ke bagian bawah microwell plate ELISA dengan baik, hindari menyentuh dinding bagian dalam dan menyebabkan busa sebanyak mungkin.
2. Tuang cairan dari masing-masing sumur, jangan dicuci. Segera tambahkan 100 μL larutan Biotinylated Detection Ab untuk masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 1 jam pada suhu 37 ° C.
3. Tuang larutan dari masing-masing sumuran, tambahkan 350μL wash buffer ke setiap sumuran. Rendam selama 1-2 menit dan aspirasi atau tuang larutan dari masing-masing sumuran dan tepuk kering di atas kertas penyerap. Ulangi langkah cuci ini 3 kali.
4. Tambahkan 100μL larutan HRP conjugate ke masing-masing sumuran. Tutup dengan plate sealer. Inkubasi selama 30 menit pada suhu 37 ° C.
5. Tuang larutan dari setiap sumur, ulangi proses pencucian sebanyak 5 kali seperti yang dilakukan pada langkah 3.
6. Tambahkan 90μL Reagen Substrat ke setiap sumuran. Tutup dengan plate sealer baru. Inkubasi selama sekitar 15 menit pada suhu 37 ° C. Lindungi plate dari cahaya.
7. Tambahkan 50μL Stop Solution ke masing-masing sumur..
8. Tentukan Optical Density (nilai OD) dari setiap sumuran sekaligus dengan microplate reader yang diatur ke panjang gelombang 450 nm.
Referensi
Dahlman-Wright, K et al. 2006. International Union of Pharmacology. LXIV. Estrogen Receptors. Pharmacol. Rev. 58 (4): 773–81.
Lee, H. R.; Kim, T. H dan Choi, K. C. 2012. Functions and Physiological Roles of Two Types of Estrogen Receptors, ERα and ERβ, Identified by Estrogen Receptor Knockout Mouse. Laboratory Animal Research. 28 (2): 71–6.
Paterni, I.; Granchi, C.; Katzenellenbogen, J. A dan Minutolo, F 2014). Estrogen Receptors Alpha (ERα) and Beta (ERβ): Subtype-Selective Ligands and Clinical Potential. Steroids. 90: 13–29.
0 Komentar